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梯度浓度胶8_梯度胶怎么配
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梯度浓度胶8_梯度胶怎么配

时间:2024-01-03 09:19 点击:200 次
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梯度浓度胶8(Gradient gel 8)是一种常用的蛋白质电泳分离技术,可用于分离不同大小和电荷的蛋白质。梯度浓度胶8的制备需要精确的配方和操作,本文将详细介绍梯度浓度胶8的配方和制备方法,以帮助读者更好地理解和应用该技术。

背景

梯度浓度胶8是一种基于聚丙烯酰胺凝胶的电泳分离技术,常用于分离蛋白质。梯度浓度胶8的制备需要准确的配方和操作,以确保凝胶的均匀性和稳定性。梯度浓度胶8的制备方法有多种,本文将介绍一种常用的方法。

配方

梯度浓度胶8的配方包括以下成分:

  • 30%丙烯酰胺:30 ml
  • 1.5 M Tris-HCl pH 8.8:10 ml
  • 10% SDS:1 ml
  • 10%铵过硫酸铵:1 ml
  • TEMED:15 μl
  • 10% APS:15 μl
  • 蒸馏水:43.985 ml

制备方法

以下是梯度浓度胶8的制备方法:

  1. 将30%丙烯酰胺、1.5 M Tris-HCl pH 8.8、10% SDS、10%铵过硫酸铵和蒸馏水混合,搅拌均匀。
  2. 将TEMED和10% APS加入混合液中,快速搅拌均匀。
  3. 将混合液倒入预制的凝胶模具中。
  4. 在凝胶表面涂上少量蒸馏水,以去除氧气。
  5. 等待凝胶凝固,通常需要20-30分钟。

注意事项

在制备梯度浓度胶8时,尊龙凯时人生就是博z6com需要注意以下事项:

  • 配方中的各种成分应该按照比例准确称量。
  • TEMED和10% APS应该在混合液中加入后立即搅拌均匀,以防止凝胶过早凝固。
  • 在凝胶表面涂上少量蒸馏水,可以去除氧气,防止凝胶表面出现气泡。
  • 凝胶应该在室温下静置20-30分钟,以确保凝胶完全凝固。

应用

梯度浓度胶8可用于分离不同大小和电荷的蛋白质,常用于以下应用:

  • 分离蛋白质混合物中的特定蛋白质。
  • 分析蛋白质的分子量和电荷。
  • 纯化蛋白质。

梯度浓度胶8是一种常用的蛋白质电泳分离技术,其制备需要准确的配方和操作。本文介绍了梯度浓度胶8的配方和制备方法,并提供了注意事项和应用方面的信息,以帮助读者更好地理解和应用该技术。

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